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季銨鹽化合物(QACs)是一種廣泛使用的陽離子表面活性劑。它們是由銨基的氫原子被烷烴或芳烴基團取代而形成的。通式為(R4N+)X-,其中R為烴基或苯基,X-為鹵素離子如Cl-、Br-等。QACs的性質由其取代的R基團的結構和性質決定,可分為四類,即烷基三CHO-銨化合物(ATMACs)和二烷基二CHO-銨化合物(DADMACs)、芐基烷基二CHO-銨化合物(BACs)和雜環銨化合物(HACs))。那么季銨鹽消毒劑的優缺點是什么?一般來說,在季銨鹽消毒劑中QACs中取代R基團的...
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PCR產物的克隆-DNA回收實驗步驟【實驗原理】1.DNA片段回收方法:DNA片段在適當濃度的瓊脂糖凝膠中,通上一定電壓進行電泳,不同大小的DNA分子由于遷移率的不同而分離開。切下帶有所需DNA片段的凝膠,用凍融法、玻璃奶回收法或商品化膠回收試劑盒將目的片段回收純化。2.利用Taq酶能夠在PCR產物的3’末端加上一個非模板依賴的A,而T載體是一種帶有3’T突出端的載體,在連接酶作用下,可以把PCR產物插入到質粒載體的多克隆位點,可用于PCR產物的克隆和測序。商品化的T載體有很...
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實時熒光pcr檢測利用熒光分析法用特定結合DNA的染料來測定DNA的濃度。常用的DNA染料包括溴化乙錠、Hoechst33258、SYBRGreenI和II、SYBRGold及PicoGreen。溴化乙錠溴化乙錠含有三環菲嚏平面環系統,可嵌入到雙鏈DNA堿基之間。嵌入DNA雙螺旋后,溴化乙錠的菲嚏環平面位于與螺旋軸相垂直的位置,并通過范德瓦耳斯力與上下堿基結合。而其平面環系統被埋在底部,其外側的苯基和乙烷基處于DNA雙螺旋的大溝內。在高強度離子溶液的飽和狀態,大約每2.5個堿...
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熒光定量pcr常見問題的可能原因與解決方案無Ct值或Ct值延遲出現:擴增曲線信號不佳,曲線不平滑:標準曲線線性差。1.擴增產物大小不合適:實時熒光定量PCR擴增片段的長度通常在80-150bp之間,如果調整反應的時間有可能擴增500bp的片段。2.PCR反應過程中退火及延伸的時間過短或過長:應根據擴增片段的大小予與調整。3.MgCl,濃度不合適:按0.5mm的間距調整MgCI2的濃度。4.循環數設置不足:最少設置35個循環,可以增加到45個循環。超過45個循環以上背景信號會增...
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