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PCR反應的基本原理與實驗技術

一、實驗目的：掌握PCR反應的基本原理與實驗技術二、PCR反應實驗原理PCR(PolymeraseChainReaction)-聚合酶鏈式反應，可以選擇性擴增一段DNA序列。其基本步驟是，首先將待擴增的模板DNA變性使之成為單鏈，DNA樣品中，特異性的引物能夠與其互補的序列雜交，在dNTPs和Taq酶存在時，就可以合成模板DNA的互補鏈，反應完成后，將反應混合物加熱使DNA雙鏈變性，溫度下降后，過量的引物又可以開始第二輪的合成反應。這種延伸-變性-退火-延伸的循環可以重復多次...

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瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA的方法

一、實驗目的：通過本實驗學習瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA的方法和技術。二、實驗原理DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時有電荷效應和分子篩效應。DNA分子在高于等電點的pH溶液中帶負電荷在電場中向正極移動。由于糖－磷酸骨架在結構上的重復性質，相同數量的雙鏈DNA幾乎具有等量的凈電荷，因此他們能以相同的速度向正極方向移動。在一定的電場強度下，DNA分子的遷移速度取決于分子篩效應，即DNA分子本身的大小和構型。具有不同的相對分子質量的DNA片段泳動速度不一樣，可進行分離。DNA分子的遷移速度...

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病毒純化方法

病毒是一類非細胞型生物，需要寄生在其活細胞體內，雖然大部分病毒對人體是有害的，但是隨著科學的發展，發現很多病毒有較高的利用價值。例如：可以作為基因工程載體的慢病毒、腺相關病毒等；還有噬菌體展示技術，可以幫助我們對蛋白質進行相關研究；以及曾作為細胞融合應用的仙臺病毒；而病毒最重要的應用，就是用來制備滅活、減毒、亞單位疫苗。本期，我們主要對病毒疫苗生產過程中的純化方法進行介紹。病毒提純是病毒學研究的重要前提，病毒的相關詳細研究都需要高純度的病毒樣品。病毒純化是在病毒不受損、不失活...

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分光光度計選購指南

光譜儀或分光光度計是用于識別或確認樣品中物質的化學種類、化學結構或濃度的分析儀器。分光光度計將發射能量源通過溶液并測量不同波長的光強度。若溶液的分子濃度較高，則可能會吸收更多的光。所以，提交用于光譜分析的樣品必須非常純凈，以避免產生不良或受污染的結果。分光光度計主要由激發光源、濾光片、比色皿，以及光信號檢測器所組成。選擇合適的分光光度計/光譜儀時要考慮的重要標準：檢測限制您要測量的產品的密度、形狀或尺寸波長范圍分析工作范圍樣品通量（單樣品與多樣品）數據質量儀器和相關消耗品的成...

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動物細胞培養生物反應器中乳酸含量的控制方法

銨產量過多、乳酸產量過剩、營養限制或與營養補給、添加堿以控制pH值相關的高滲應激等因素，使得動物細胞培養生物反應器中的細胞密度被限制。為了部分克服這些因素，使用乳酸補充和適應LSA技術是減少銨和乳酸產生的一種簡單方法。使用這種簡單的方法，可以實現了將近乳酸產量的大幅度減少，同時在分批搖瓶培養中減少了50%的銨產量。在隨后的補料分批生物反應器培養中，使用BiosenC-Line乳酸分析儀測定乳酸產量減少了近8八倍。甚至可以實現3500萬個細胞/mL的活細胞密度和2.73億個細胞...

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